シロイヌナズナのGUS染色
提供: 鈴木研Wiki
[編集] 試薬
- 固定液 90% アセトン
- GUS buffer
- 50 mM Phospate buffer pH 7.2 (0.5M Na2HPO4 13.7 ml, 0.5M NaH2PO4 6.3 ml / 200 ml)
- 0.5 mM K3Fe(CN)6 (100 mM K3Fe(CN)6 1 ml / 200 ml)
- 0.5 mM K4Fe(CN)6 (100 mM K4Fe(CN)6 1 ml / 200 ml)
- X-Glucストック (20 mg/ml X-Gluc / DMF)
- GUS staining buffer (0.5 mg/ml X-Gluc / GUS buffer)
[編集] 手順
- サンプルを固定液に浸し、氷上で15分間おく。
- GUS bufferで2回洗う。
- GUS染色液に浸し、デシケーターで10分間脱気する。
- 37ºCで約2時間保温する。染色具合により時間は調節する。
- 70%エタノール溶液で洗浄する。もしくはエタノール酢酸溶液(エタノール:酢酸 / 6:1)で脱色する。