NucleoSpin Gel and PCR Clean-upを使ったDNA精製

2017年10月5日 (木) 12:06時点における版

NT1

NT3(初めに使用する前に、エタノールを加える）

NE

1. マイクロチューブにPCR産物とPCR産物の2倍量のNT1を加える。

2. カラムをCollection Tube(2ml)にセットし、1の溶液をカラムに添加する。

11,000×g で、30秒遠心する。

ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。

3. NT3 700μlをカラムに添加する。

11,000×g で、30秒遠心する。

ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。

4. カラムを11,000×gで、1分遠心する。

5. カラムをマイクロチューブにセットする。

NE15〜30μlを加え、室温で1分インキュベートする。

(PCR産物50μl･･･30μl , PCR産物20μl･･･20μl)

11,000×gで、1分遠心する。

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 ====実験方法====
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-#マイクロチューブにPCR産物を全部まとめて入れる。
+:1. マイクロチューブにPCR産物とPCR産物の2倍量のNT1を加える。
-#NT1をPCR産物の2倍量加える。
-#カラムと2mlチューブをセットして、サンプルを移す。
+:2. カラムをCollection Tube(2ml)にセットし、1の溶液をカラムに添加する。
-#遠心して、液を捨てる。
+::11,000×g で、30秒遠心する。
-#NT3を700μl入れ、遠心して、液を捨てる。
+::ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。
-#NT3を700μl入れ、遠心して、液を捨てる。
-#さらに、遠心1分して、新しいマイクロチューブにカラムをセットする。
+:3. NT3 700μlをカラムに添加する。
-#NEを30μl加え遠心して、マイクロチューブにDNAを移す。
+::11,000×g で、30秒遠心する。
-#-20℃で保存する。
+::ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。
+:*このステップを2回行う。
+:4. カラムを11,000×gで、1分遠心する。
+:5. カラムをマイクロチューブにセットする。
+::NE15〜30μlを加え、室温で1分インキュベートする。
+::(PCR産物50μl･･･30μl , PCR産物20μl･･･20μl)
+::11,000×gで、1分遠心する。