DNAの電気泳動
提供: 鈴木研Wiki
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2017年11月24日 (金) 15:36時点における版
目次 |
アガロースを使った電気泳動
試薬
- 1×TAE（50×TAEを50倍希釈）
- TAKARA Agarose
- 2×MightAmp Buffer 10µℓ
- GR RED Loading buffer 6×
- DNAマーカー
アガロースゲルの作製と電気泳動
| アガロースの濃度 | DNAのサイズ |
| 0.6% | 1,000～20,000 |
| 0.7% | 800～10,000 |
| 1.0% | 500～7,000 |
| 1.2% | 400～6,000 |
| 1.5% | 200～3,000 |
| 2.0% | 100～2,000 |
増やしたDNAを電気泳動で確認する
- 用意した１％アガロースゲルを電気泳動装置にセットし、1×TAEバッファーをゲルが浸るまで加える
- アガロースゲルの一番左のウェルにDNAマーカー４μℓを20μピペットマンでアプライする。
- 前日用意したPCR産物を別の8連マイクロチューブに4μℓ取りその中にGR RED Loading bufferを1μ加えて遠心する。（全量5μℓ）
- できたサンプル5μℓ全量をアガロースゲルにそれぞれアプライする。
- マーカー及びサンプルをすべてゲルにアプライしたら電気泳動を開始する（10分から20分程度）
- 電気泳動が終了したらゲルを電気泳動装置から取り出しUV透過ゲルトレイに乗せ電気泳動ゲル撮影用デジタルカメラ遮光フード装置に持っていき撮影する。（結果を確認するまでゲルは捨てないこと）
- 撮影したデータを持ってパソコンに保存、印刷する。
