NucleoSpin Plasmid Quick Pureを使ったプラスミド抽出
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| + | *大腸菌の培養液 | ||
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2019年1月21日 (月) 11:52時点における版
試薬
- NucleoSpin Plasmid QuickPure
- A1(初めに使用する前に、RNase A (凍結乾燥品）のチューブに１ mlのBuffer A1を加えて完全に溶解し、溶解した溶液全量をBuffer A1のボトルに移す)
- A2
- A3
- AQ(初めに使用する前に、Wash Buffer AQ（concentrate）に、4倍量のエタノール（96～100%）を添加する）
- AE
- 大腸菌の培養液
実験方法
- 1. マイクロチューブにPCR産物とPCR産物の2倍量のNT1を加える。
- 2. カラムをCollection Tube(2ml)にセットし、1の溶液をカラムに添加する。
- 11,000×g で、30秒遠心する。
- ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。
- 3. NT3 700μlをカラムに添加する。
- 11,000×g で、30秒遠心する。
- ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。
- このステップを2回行う。
- 4. カラムを11,000×gで、1分遠心しメンブレンを乾燥させる。
- 5. カラムをマイクロチューブにセットする。
- NE15〜30μlを加え、室温で1分インキュベートする。
- (PCR産物50μl･･･30μl , PCR産物20μl･･･20μl)
- 11,000×gで、1分遠心する。
