NucleoSpin Plasmid Quick Pureを使ったプラスミド抽出

2019年1月21日 (月) 12:01時点における版

A1(初めに使用する前に、RNase A (凍結乾燥品）のチューブに１ mlのBuffer A1を加えて完全に溶解し、溶解した溶液全量をBuffer A1のボトルに移す)

A2

A3

AQ(初めに使用する前に、Wash Buffer AQ（concentrate）に、4倍量のエタノール（96～100%）を添加する）

AE

1. 培養液の集菌

培養液をマイクロチューブにデカンテーションで移す。

11,000gで、30秒遠心する。

上清をアスピレーターで除く。

2. 菌の溶解

11,000×g で、30秒遠心する。

ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。

3. NT3 700μlをカラムに添加する。

11,000×g で、30秒遠心する。

ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。

4. カラムを11,000×gで、1分遠心しメンブレンを乾燥させる。

5. カラムをマイクロチューブにセットする。

NE15〜30μlを加え、室温で1分インキュベートする。

(PCR産物50μl･･･30μl , PCR産物20μl･･･20μl)

11,000×gで、1分遠心する。

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 ====実験方法====
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-:1. マイクロチューブにPCR産物とPCR産物の2倍量のNT1を加える。
+:1. 培養液の集菌
+::培養液をマイクロチューブにデカンテーションで移す。
-:2. カラムをCollection Tube(2ml)にセットし、1の溶液をカラムに添加する。
+::11,000gで、30秒遠心する。
+::上清をアスピレーターで除く。
+:2. 菌の溶解
 ::11,000×g で、30秒遠心する。
 ::ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。