DNAの定量 (Promega QuantiFluor)
提供: 鈴木研Wiki
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+ | # 100, 10, 1 ng/µl それぞれを2倍に希釈して 50, 5, 0.5 ng/µl を作成する。それぞれ10 µl程度あればよい。 | ||
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+ | == 定量 == | ||
# 以下を混ぜる | # 以下を混ぜる | ||
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− | |1サンプル||10サンプル | + | |||1サンプル||10サンプル |
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# 200µlずつ分注する。 | # 200µlずつ分注する。 | ||
# 1µlサンプルを加える。よく混ぜる。 | # 1µlサンプルを加える。よく混ぜる。 | ||
# 蛍光を測定する。490nm 励起、510-570nm 蛍光。 | # 蛍光を測定する。490nm 励起、510-570nm 蛍光。 |
2016年3月10日 (木) 10:45時点における版
目次 |
試薬
- Promega社 QuantiFluor dsDNA System
- 20x TE
- 100 ng/µl λDNA
- 200x Dye
手順
標品を準備する
- 100 ng/µl λDNAを水または適当なバッファーで10倍に希釈して 10 ng/µl を作成する。20 µl程度あればよい。
- 同様に10 ng/µl から 1 ng/µl を作成する。
- 100, 10, 1 ng/µl それぞれを2倍に希釈して 50, 5, 0.5 ng/µl を作成する。それぞれ10 µl程度あればよい。
定量
- 以下を混ぜる
1サンプル | 10サンプル | |
H2O | 190µl | 1.9 ml |
20x TE | 10µl | 100 µl |
200x Dye | 0.5 µl | 5 µl |
- 200µlずつ分注する。
- 1µlサンプルを加える。よく混ぜる。
- 蛍光を測定する。490nm 励起、510-570nm 蛍光。