DNAの電気泳動
提供: 鈴木研Wiki
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| − | # | + | #ゲルトレイ（ケース、トレイ、コーム）を準備する。 |
| − | # | + | #ゲルトレイのサイズに応じたTAEを三角フラスコに分注する。 ※Mupid（大：2枚、小：4枚）の場合、200ml |
#アガロースを量って入れる。 | #アガロースを量って入れる。 | ||
#電子レンジでアガロースを完全に溶かす。 | #電子レンジでアガロースを完全に溶かす。 | ||
#水道水でアガロース溶液を素手で持てるぐらいまで冷やす。 | #水道水でアガロース溶液を素手で持てるぐらいまで冷やす。 | ||
| − | # | + | #トレイにアガロースを流し込む。ケースとトレイの間の空気を抜く。コームをさす。 |
#固まるのを待つ。すぐに使わない場合は、固まってから冷蔵庫で保存 | #固まるのを待つ。すぐに使わない場合は、固まってから冷蔵庫で保存 | ||
2020年4月8日 (水) 17:27時点における版
目次 |
現在、編集中！！
アガロースを使った電気泳動
試薬
- 1×TAE（50×TAEを50倍希釈）
- TAKARA Agarose
- GR RED Loading buffer 6×
- DNA分子量マーカー
アガロースゲルの作製
| アガロースの濃度(W/V) | DNAのサイズ(bp) |
| 0.6% | 1,000～20,000 |
| 0.7% | 800～10,000 |
| 1.0% | 500～7,000 |
| 1.2% | 400～6,000 |
| 1.5% | 200～3,000 |
| 2.0% | 100～2,000 |
- (目安) 1kb以下：1.5%、1kb以上：0.7%
- ゲルトレイ（ケース、トレイ、コーム）を準備する。
- ゲルトレイのサイズに応じたTAEを三角フラスコに分注する。 ※Mupid（大：2枚、小：4枚）の場合、200ml
- アガロースを量って入れる。
- 電子レンジでアガロースを完全に溶かす。
- 水道水でアガロース溶液を素手で持てるぐらいまで冷やす。
- トレイにアガロースを流し込む。ケースとトレイの間の空気を抜く。コームをさす。
- 固まるのを待つ。すぐに使わない場合は、固まってから冷蔵庫で保存
電気泳動
- サンプルと「10x泳動Buffer」（サンプルの1/10量）を混ぜる
- 泳動層にゲル（ゲル板はつけたまま）を入れ、TAEを満たす。
- サンプル10μlと左端にマーカー4μl(GR RED 1μl+マーカー4μl)をアプライし、100Vで泳動する。
- 泳動が終了したら、ゲルをUV透過ゲルトレイに乗せ、トランスイルミネーターでDNAを可視化する。写真を撮る。
- SDカードから撮影したデータを保存する。
