MultiNAを使った電気泳動
提供: 鈴木研Wiki
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| − | == | + | ==試薬== |
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| + | |MultiNA用試薬||ラダー | ||
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| − | |DNA-500 | + | |DNA-500||25bp DNA ラダー |
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| + | |DNA-12000||2-Log DNA Ladder (0.1-10.0 kbp) | ||
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| − | + | *SYBR Gold | |
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| − | + | ==ストック溶液の作成== | |
| − | + | * 希釈色素液 | |
| − | + | # SYBR Gold 1µlとTE 99µlを混ぜ合わせる | |
| + | # -20℃で保存する。 | ||
| + | * ラダーを希釈する (希釈したラダーは-20℃で保存する) | ||
| + | # 25bp DNA ラダーはTEで50倍に希釈する。 | ||
| + | # 2-Log DNA LadderはTEで100倍に希釈する。 | ||
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| + | ==使用時に調整するもの== | ||
| + | * 希釈色素液を分離バッファーで100倍に希釈する。必要量はサンプルを設定した後計算されるが、以下を参考に調整してもよい。 | ||
| + | {| class='wikitable' | ||
| + | |合計分析数||8分析以下||9-29分析||30-79分析||80-120分析 | ||
| + | |- | ||
| + | |分離バッファーの量 (µl)||495||990||1980||2970 | ||
| + | |- | ||
| + | |希釈色素液の量 (µl)||5||10||20||30 | ||
| + | |} | ||
| + | * 洗浄水の量を確認する。足りないときはミリQ水を補充する。 | ||
| − | 使用方法 | + | ==使用方法== |
前日使用していないときは全チップクリーニングをする。 | 前日使用していないときは全チップクリーニングをする。 | ||
2016年4月13日 (水) 15:58時点における版
目次 |
MultiNAを使った電気泳動
試薬
| MultiNA用試薬 | ラダー |
| DNA-500 | 25bp DNA ラダー |
| DNA-12000 | 2-Log DNA Ladder (0.1-10.0 kbp) |
- SYBR Gold
ストック溶液の作成
- 希釈色素液
- SYBR Gold 1µlとTE 99µlを混ぜ合わせる
- -20℃で保存する。
- ラダーを希釈する (希釈したラダーは-20℃で保存する)
- 25bp DNA ラダーはTEで50倍に希釈する。
- 2-Log DNA LadderはTEで100倍に希釈する。
使用時に調整するもの
- 希釈色素液を分離バッファーで100倍に希釈する。必要量はサンプルを設定した後計算されるが、以下を参考に調整してもよい。
| 合計分析数 | 8分析以下 | 9-29分析 | 30-79分析 | 80-120分析 |
| 分離バッファーの量 (µl) | 495 | 990 | 1980 | 2970 |
| 希釈色素液の量 (µl) | 5 | 10 | 20 | 30 |
- 洗浄水の量を確認する。足りないときはミリQ水を補充する。
使用方法
前日使用していないときは全チップクリーニングをする。 一日の最初にチップ洗浄を行う(2回)。
MultiNA装置制御を起動する。 サンプルの登録を行う。 必要な分離バッファーとマーカーの量が表示されるので、分離バッファーは専用のチューブに、マーカーは0.5mlチューブに分注して、所定の位置に設置する。分離バッファーとマーカーのラベルの色と装置内の置き場所の色が同じ。 自分のサンプルをセットする。サンプルは5µl以上必要で、そのうち1µlが使用される。 ラダーもセットする。ラダーは10µl程度セットする。 サンプルを固定するための金属の網をかぶせる。 蓋をする。 制御用ソフトでランを開始する。泳動終了後に自動で洗浄を2回行うようにしておく。
一日の最後に全チップクリーニングを行う。チップクリーニングを行ったまま帰宅してよい。
