C培地の作成 (クンショウモの育成)

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!!! ストック (100ml) !!  !! 終濃度 (100ml) !! 100mlに対し入れる量
 
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| Ca(NO3)2|| style="text-align:right;"| 1.5g || style="text-align:right;"| 100 × || style="text-align:right;"| 15mg ||style="text-align:right;"| 1 ml
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| Ca(NO3)2|| style="text-align:right;"| 1.5g || style="text-align:right;"| 100× || style="text-align:right;"| 15mg ||style="text-align:right;"|  
 
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| Tris-Hcl(pH7.5) || style="text-align:right;"| 5g || style="text-align:right;"| 100×　|| style="text-align:right;"| 50mg|| style="text-align:right;"| 1ml
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| Vitamin Mix 1000×/ml || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| 100μl
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|  *Vitamin B12  || style="text-align:right;"|0.1μg/ml || style="text-align:right;"| 1000× || style="text-align:right;"| 0.01μg|| style="text-align:right;" |
 
|  *Vitamin B12  || style="text-align:right;"|0.1μg/ml || style="text-align:right;"| 1000× || style="text-align:right;"| 0.01μg|| style="text-align:right;" |
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|  *Thiamine Hcl  || style="text-align:right;"| 10μg/ml || style="text-align:right;"| 1000× || style="text-align:right;"| 1μg || style="text-align:right;"|  
 
|  *Thiamine Hcl  || style="text-align:right;"| 10μg/ml || style="text-align:right;"| 1000× || style="text-align:right;"| 1μg || style="text-align:right;"|  
 
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*0.3% Gellan Gum
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====（ストック溶液）====
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* '''PIV metals''' (*1)：100ml作る場合
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! 試薬 !! ストック液 !! 添加量 (100ml) !! 備考
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| MnCl2 ||style="text-align:right;"| 1000x ||style="text-align:right;"| 0.1 ml || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目
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| ZnCl2 ||style="text-align:right;"| 1000x ||style="text-align:right;"| 0.1 ml || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目
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| CoCl2 ||style="text-align:right;"| 1000x ||style="text-align:right;"| 0.1 ml || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目
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| Na2MoO4 ||style="text-align:right;"| 1000x ||style="text-align:right;"| 0.1 ml || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目
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| FeCl3 ||style="text-align:right;"| 50x ||style="text-align:right;"| 2 ml || style="text-align:left;"| 4℃
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| Na2EDTA・2H2O ||style="text-align:right;"| 1000x ||style="text-align:right;"| 100 mg || style="text-align:left;"| 試薬棚(N)、2NA(EDTA・2H2O)
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* '''C培地 1000xビタミン''' (*2)：5ml作る場合
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! 試薬 !! ストック液 !!  !! 添加量(5ml) !! 備考
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| Vitamin B12 ||style="text-align:left;"| 1mg/100ml ||style="text-align:right;"| 100x ||style="text-align:right;"| 50 µl || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目
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| Biotin ||style="text-align:left;"| 1mg/100ml ||style="text-align:right;"| 100x ||style="text-align:right;"| 50 µl || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目
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| Thiamine HCl ||style="text-align:left;"| 5mg/5ml ||style="text-align:right;"| 100x ||style="text-align:right;"| 50 µl || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目
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* '''Tris-HCl (pH7.5)''' (*3)：(100x) 5g/100ml
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== 実験方法 ==
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: 1.　メスシリンダーに
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::* Elix 水
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::* Ca(NO3)2
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::* KNO3
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::* MgS04
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::* Tris-Hcl (pH7.5)
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::* PIV metals
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::* Vitamin Mix 1000×
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:: 以上の8つを入れて、メスアップする
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: 2. メデュウムビンに
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::* 0.3％ Gellan Gum
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:: を入れ、アルミホイルで蓋を覆い、培地の種類、作製日、作成者を書く
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:: メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)

2024年1月23日 (火) 16:59時点における最新版

[編集] 組成

[[[1]] ＋　品川さんノート（中部大No.2・28頁）、あるいは丹羽ノートNo.1・40頁を参照

ストック (100ml) 終濃度 (100ml) 100mlに対し入れる量
Ca(NO3)2 1.5g 100× 15mg
KNO3 1g 100× 10mg
Na2glycerophosphate 0.5g 100× 5mg
MgSO4 0.8g 200× 4mg
Tris-Hcl(pH7.5) (*3) 5g 100× 50mg
PIV metals (*1) 300μl
Vitamin Mix 1000×/ml (*2)
*Vitamin B12 0.1μg/ml 1000× 0.01μg
*Biotin 0.1μg/ml 1000× 0.01μg
*Thiamine Hcl 10μg/ml 1000× 1μg
  • 0.3% Gellan Gum


[編集] （ストック溶液）

  • PIV metals (*1)：100ml作る場合
試薬 ストック液 添加量 (100ml) 備考
MnCl2 1000x 0.1 ml -20℃：下扉左上1段目
ZnCl2 1000x 0.1 ml -20℃：下扉左上1段目
CoCl2 1000x 0.1 ml -20℃：下扉左上1段目
Na2MoO4 1000x 0.1 ml -20℃：下扉左上1段目
FeCl3 50x 2 ml 4℃
Na2EDTA・2H2O 1000x 100 mg 試薬棚(N)、2NA(EDTA・2H2O)


  • C培地 1000xビタミン (*2)：5ml作る場合
試薬 ストック液 添加量(5ml) 備考
Vitamin B12 1mg/100ml 100x 50 µl -20℃：下扉左上1段目
Biotin 1mg/100ml 100x 50 µl -20℃：下扉左上1段目
Thiamine HCl 5mg/5ml 100x 50 µl -20℃：下扉左上1段目


  • Tris-HCl (pH7.5) (*3)：(100x) 5g/100ml


[編集] 実験方法

1.　メスシリンダーに
  • Elix 水
  • Ca(NO3)2
  • KNO3
  • Na2glycerophosphate
  • MgS04
  • Tris-Hcl (pH7.5)
  • PIV metals
  • Vitamin Mix 1000×


以上の8つを入れて、メスアップする


2. メデュウムビンに
  • 0.3％ Gellan Gum
を入れ、アルミホイルで蓋を覆い、培地の種類、作製日、作成者を書く
メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)
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