C培地の作成 (クンショウモの育成)
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====（ストック溶液）==== | ====（ストック溶液）==== | ||
* PIV metals (*1) | * PIV metals (*1) | ||
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2024年1月23日 (火) 16:10時点における版
組成
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| ストック (100ml) | 終濃度 (100ml) | 100mlに対し入れる量 | ||
|---|---|---|---|---|
| Ca(NO3)2 | 1.5g | 100× | 15mg | |
| KNO3 | 1g | 100× | 10mg | |
| Na2glycerophosphate | 0.5g | 100× | 5mg | |
| MgSO4 | 0.8g | 200× | 4mg | |
| Tris-Hcl(pH7.5) | 5g | 100× | 50mg | |
| PIV metals (*1) | 300μl | |||
| Vitamin Mix 1000×/ml | ||||
| *Vitamin B12 | 0.1μg/ml | 1000× | 0.01μg | |
| *Biotin | 0.1μg/ml | 1000× | 0.01μg | |
| *Thiamine Hcl | 10μg/ml | 1000× | 1μg |
- 0.3% Gellan Gum
（ストック溶液）
- PIV metals (*1)
| 試薬 | ストック液 | 添加量 | 備考 |
|---|---|---|---|
| MnCl2 | 0.1 ml | ||
| 2×MightyAmp buffer Ver3 | 10 µl | ||
| プライマー (Forward) | 終濃度0.3 µM | 10µMの場合、0.6 µl | |
| プライマー (Reverse) | 終濃度0.3 µM | 10µMの場合、0.6 µl | |
| DNA | 1 µl | ||
| 滅菌水 | up to 20 µl | ||
| 合計 | 20 µl |
実験方法
- 1. メスシリンダーに
- Elix 水
- Ca(NO3)2
- KNO3
- Na2glycerophosphate
- MgS04
- Tris-Hcl (pH7.5)
- PIV metals
- Vitamin Mix 1000×
- 以上の8つを入れて、メスアップする
- 2. メデュウムビンに
- 0.3％ Gellan Gum
- を入れ、アルミホイルで蓋を覆い、培地の種類、作製日、作成者を書く
- メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)
