C培地の作成 (クンショウモの育成)
提供: 鈴木研Wiki
(版間での差分)
| 15行: | 15行: | ||
| MgSO4 || style="text-align:right;"| 0.8g || style="text-align:right;"| 200× || style="text-align:right;"| 4mg || style="text-align:right;"| | | MgSO4 || style="text-align:right;"| 0.8g || style="text-align:right;"| 200× || style="text-align:right;"| 4mg || style="text-align:right;"| | ||
|- | |- | ||
| − | | Tris-Hcl(pH7.5) || style="text-align:right;"| 5g || style="text-align:right;"| 100× || style="text-align:right;"| 50mg|| style="text-align:right;"| | + | | Tris-Hcl(pH7.5) (*3) || style="text-align:right;"| 5g || style="text-align:right;"| 100× || style="text-align:right;"| 50mg|| style="text-align:right;"| |
|- | |- | ||
| PIV metals (*1) || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| 300μl|| style="text-align:right;"| | | PIV metals (*1) || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| 300μl|| style="text-align:right;"| | ||
|- | |- | ||
| − | | Vitamin Mix 1000×/ml || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| | + | | Vitamin Mix 1000×/ml (*2) || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| || style="text-align:right;"| |
|- | |- | ||
| *Vitamin B12 || style="text-align:right;"|0.1μg/ml || style="text-align:right;"| 1000× || style="text-align:right;"| 0.01μg|| style="text-align:right;" | | | *Vitamin B12 || style="text-align:right;"|0.1μg/ml || style="text-align:right;"| 1000× || style="text-align:right;"| 0.01μg|| style="text-align:right;" | | ||
| 32行: | 32行: | ||
====（ストック溶液）==== | ====（ストック溶液）==== | ||
| − | * PIV metals (*1) | + | * '''PIV metals''' (*1)：100ml作る場合 |
{| class="wikitable" | {| class="wikitable" | ||
|- | |- | ||
| − | ! 試薬 !! ストック液 !! 添加量 !! 備考 | + | ! 試薬 !! ストック液 !! 添加量 (100ml) !! 備考 |
|- | |- | ||
| MnCl2 ||style="text-align:right;"| 1000x ||style="text-align:right;"| 0.1 ml || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目 | | MnCl2 ||style="text-align:right;"| 1000x ||style="text-align:right;"| 0.1 ml || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目 | ||
| 50行: | 50行: | ||
|} | |} | ||
| + | |||
| + | * '''C培地 1000xビタミン''' (*2)：5ml作る場合 | ||
| + | {| class="wikitable" | ||
| + | |- | ||
| + | ! 試薬 !! ストック液 !! !! 添加量(5ml) !! 備考 | ||
| + | |- | ||
| + | | Vitamin B12 ||style="text-align:left;"| 1mg/100ml ||style="text-align:right;"| 100x ||style="text-align:right;"| 50 µl || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目 | ||
| + | |- | ||
| + | | Biotin ||style="text-align:left;"| 1mg/100ml ||style="text-align:right;"| 100x ||style="text-align:right;"| 50 µl || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目 | ||
| + | |- | ||
| + | | Thiamine HCl ||style="text-align:left;"| 5mg/5ml ||style="text-align:right;"| 100x ||style="text-align:right;"| 50 µl || style="text-align:left;"| -20℃：下扉左上1段目 | ||
| + | |} | ||
| + | |||
| + | |||
| + | * '''Tris-HCl (pH7.5)''' (*3)：(100x) 5g/100ml | ||
== 実験方法 == | == 実験方法 == | ||
2024年1月23日 (火) 16:58時点における版
組成
[[[1]] ＋ 品川さんノート（中部大No.2・28頁）を参照
| ストック (100ml) | 終濃度 (100ml) | 100mlに対し入れる量 | ||
|---|---|---|---|---|
| Ca(NO3)2 | 1.5g | 100× | 15mg | |
| KNO3 | 1g | 100× | 10mg | |
| Na2glycerophosphate | 0.5g | 100× | 5mg | |
| MgSO4 | 0.8g | 200× | 4mg | |
| Tris-Hcl(pH7.5) (*3) | 5g | 100× | 50mg | |
| PIV metals (*1) | 300μl | |||
| Vitamin Mix 1000×/ml (*2) | ||||
| *Vitamin B12 | 0.1μg/ml | 1000× | 0.01μg | |
| *Biotin | 0.1μg/ml | 1000× | 0.01μg | |
| *Thiamine Hcl | 10μg/ml | 1000× | 1μg |
- 0.3% Gellan Gum
（ストック溶液）
- PIV metals (*1)：100ml作る場合
| 試薬 | ストック液 | 添加量 (100ml) | 備考 |
|---|---|---|---|
| MnCl2 | 1000x | 0.1 ml | -20℃：下扉左上1段目 |
| ZnCl2 | 1000x | 0.1 ml | -20℃：下扉左上1段目 |
| CoCl2 | 1000x | 0.1 ml | -20℃：下扉左上1段目 |
| Na2MoO4 | 1000x | 0.1 ml | -20℃：下扉左上1段目 |
| FeCl3 | 50x | 2 ml | 4℃ |
| Na2EDTA・2H2O | 1000x | 100 mg | 試薬棚(N)、2NA(EDTA・2H2O) |
- C培地 1000xビタミン (*2)：5ml作る場合
| 試薬 | ストック液 | 添加量(5ml) | 備考 | |
|---|---|---|---|---|
| Vitamin B12 | 1mg/100ml | 100x | 50 µl | -20℃：下扉左上1段目 |
| Biotin | 1mg/100ml | 100x | 50 µl | -20℃：下扉左上1段目 |
| Thiamine HCl | 5mg/5ml | 100x | 50 µl | -20℃：下扉左上1段目 |
- Tris-HCl (pH7.5) (*3)：(100x) 5g/100ml
実験方法
- 1. メスシリンダーに
- Elix 水
- Ca(NO3)2
- KNO3
- Na2glycerophosphate
- MgS04
- Tris-Hcl (pH7.5)
- PIV metals
- Vitamin Mix 1000×
- 以上の8つを入れて、メスアップする
- 2. メデュウムビンに
- 0.3％ Gellan Gum
- を入れ、アルミホイルで蓋を覆い、培地の種類、作製日、作成者を書く
- メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)
