DNAの電気泳動
提供: 鈴木研Wiki
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(→アガロースゲルの作製と電気泳動) |
(→増やしたDNAを電気泳動で確認する) |
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| − | # | + | #ゲルトレーを準備する。 |
| − | # | + | #トレーのサイズに応じたTAEを三角フラスコに分注する。 |
| − | # | + | #アガロースを量って入れる。 |
| − | # | + | #電子レンジでアガロースを完全に溶かす。 |
| − | # | + | #水道水でアガロース溶液を素手で持てるぐらいまで冷やす。 |
| − | # | + | #トレーにアガロースを流し込む。コームをさす。 |
| − | # | + | #固まるのを待つ。 |
| + | #サンプル(20μl)にGR RED Loading bufferを4μl加えて遠心する。 | ||
| + | #泳動層にトレーを入れ、TAEを満たす。 | ||
| + | #サンプル10μlと左端にマーカーをアプライし、100Vで泳動する。 | ||
| + | #泳動が終了したら、ゲルをUV透過ゲルトレイに乗せ、トランスイルミネーターでDNAを可視化する。写真を撮る。 | ||
| + | #SDカードから撮影したデータを保存する。 | ||
2017年11月24日 (金) 16:26時点における版
アガロースを使った電気泳動
試薬
- 1×TAE（50×TAEを50倍希釈）
- TAKARA Agarose
- 2×MightAmp Buffer 10µℓ
- GR RED Loading buffer 6×
- DNAマーカー
アガロースゲルの作製と電気泳動
| アガロースの濃度 | DNAのサイズ |
| 0.6% | 1,000～20,000 |
| 0.7% | 800～10,000 |
| 1.0% | 500～7,000 |
| 1.2% | 400～6,000 |
| 1.5% | 200～3,000 |
| 2.0% | 100～2,000 |
- ゲルトレーを準備する。
- トレーのサイズに応じたTAEを三角フラスコに分注する。
- アガロースを量って入れる。
- 電子レンジでアガロースを完全に溶かす。
- 水道水でアガロース溶液を素手で持てるぐらいまで冷やす。
- トレーにアガロースを流し込む。コームをさす。
- 固まるのを待つ。
- サンプル(20μl)にGR RED Loading bufferを4μl加えて遠心する。
- 泳動層にトレーを入れ、TAEを満たす。
- サンプル10μlと左端にマーカーをアプライし、100Vで泳動する。
- 泳動が終了したら、ゲルをUV透過ゲルトレイに乗せ、トランスイルミネーターでDNAを可視化する。写真を撮る。
- SDカードから撮影したデータを保存する。
