シロイヌナズナのGUS染色
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* 固定液 90% アセトン | * 固定液 90% アセトン | ||
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* GUS buffer | * GUS buffer | ||
| − | ** | + | ** 50 mM Phospate buffer pH 7.2 (0.5M Na<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub> 13.7 ml, 0.5M NaH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub> 6.3 ml / 200 ml) |
| + | ** 0.5 mM K<sub>3</sub>Fe(CN)<sub>6</sub> (100 mM K<sub>3</sub>Fe(CN)<sub>6</sub> 1 ml / 200 ml) | ||
| + | ** 0.5 mM K<sub>4</sub>Fe(CN)<sub>6</sub> (100 mM K<sub>4</sub>Fe(CN)<sub>6</sub> 1 ml / 200 ml) | ||
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| + | * X-Glucストック (20 mg/ml X-Gluc / DMF) | ||
| + | * GUS staining buffer (0.5 mg/ml X-Gluc / GUS buffer) | ||
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2018年11月15日 (木) 11:38時点における最新版
[編集] 試薬
- 固定液 90% アセトン
- GUS buffer
- 50 mM Phospate buffer pH 7.2 (0.5M Na2HPO4 13.7 ml, 0.5M NaH2PO4 6.3 ml / 200 ml)
- 0.5 mM K3Fe(CN)6 (100 mM K3Fe(CN)6 1 ml / 200 ml)
- 0.5 mM K4Fe(CN)6 (100 mM K4Fe(CN)6 1 ml / 200 ml)
- X-Glucストック (20 mg/ml X-Gluc / DMF)
- GUS staining buffer (0.5 mg/ml X-Gluc / GUS buffer)
[編集] 手順
- サンプルを固定液に浸し、氷上で15分間おく。
- GUS bufferで2回洗う。
- GUS染色液に浸し、デシケーターで10分間脱気する。
- 37ºCで約2時間保温する。染色具合により時間は調節する。
- 70%エタノール溶液で洗浄する。もしくはエタノール酢酸溶液(エタノール:酢酸 / 6:1)で脱色する。
