インバースPCR
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# リン酸化するプライマー(S)を 2μl、T4 PNKを 1μl、T4 DNA Ligase Bufferを 2μl加え、H2Oで全量を20μlにする。 | # リン酸化するプライマー(S)を 2μl、T4 PNKを 1μl、T4 DNA Ligase Bufferを 2μl加え、H2Oで全量を20μlにする。 | ||
2019年12月3日 (火) 19:49時点における版
目次 |
プライマーのリン酸化
試薬
- リン酸化するプライマーS(50μM)
- T4 PNK(Poly Nucleotide Kinase)
- T4 DNA Ligase Buffer
作成手順
- リン酸化するプライマー(S)を 2μl、T4 PNKを 1μl、T4 DNA Ligase Bufferを 2μl加え、H2Oで全量を20μlにする。
- それを 37℃で30分保温する。
- 次に 65℃で20分保温する。
- 最後に H2Oを 80μl加え、全量を 100μlにして、リン酸化済み 1μMのプライマーを作成する。
- -20℃で保存する。
