DNAの定量 (Promega QuantiFluor)

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== 標品を準備する ==
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# 100 ng/µl λDNAを水または適当なバッファーで10倍に希釈して 10 ng/µl を作成する。20 µl程度あればよい。
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# 同様に10 ng/µl から 1 ng/µl を作成する。
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== 定量 ==
 
# 以下を混ぜる
 
# 以下を混ぜる
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# 200µlずつ分注する。
 
# 200µlずつ分注する。
 
# 1µlサンプルを加える。よく混ぜる。
 
# 1µlサンプルを加える。よく混ぜる。
 
# 蛍光を測定する。490nm 励起、510-570nm 蛍光。
 
# 蛍光を測定する。490nm 励起、510-570nm 蛍光。

2016年3月10日 (木) 10:45時点における版

目次

試薬

  • Promega社 QuantiFluor dsDNA System
    • 20x TE
    • 100 ng/µl λDNA
    • 200x Dye

手順

標品を準備する

  1. 100 ng/µl λDNAを水または適当なバッファーで10倍に希釈して 10 ng/µl を作成する。20 µl程度あればよい。
  2. 同様に10 ng/µl から 1 ng/µl を作成する。
  3. 100, 10, 1 ng/µl それぞれを2倍に希釈して 50, 5, 0.5 ng/µl を作成する。それぞれ10 µl程度あればよい。

定量

  1. 以下を混ぜる
1サンプル 10サンプル
H2O 190µl 1.9 ml
20x TE 10µl 100 µl
200x Dye 0.5 µl 5 µl
  1. 200µlずつ分注する。
  2. 1µlサンプルを加える。よく混ぜる。
  3. 蛍光を測定する。490nm 励起、510-570nm 蛍光。
個人用ツール
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