TAクローニング

使用するキット

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• 「TArget Clone -Plus-」 (Toyobo) 　＠-20℃フリーザー

実験方法

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(1) PCR産物の調製

• 精製したPCR産物を用いる場合、以下の要領で調製する。

	添加量	終濃度
dH2O	1.66 µl	-
KOD -Plus- 10x Buffer	0.9 µl	1x (10倍希釈)
25mM MgSO4	0.54 µl	1.5mM (16.6倍希釈)
2mM dNTPs	0.9 µl	0.2mM (10倍希釈)
精製PCR産物	5 µl	-

最終濃度が1ｘ Taqバッファー、1.5mM MgCl2、0.2mM dNTPsとなるように試薬を添加して、以下の操作を継続してください。

1. 精製したいDNA（PCR産物など）をアガロースゲルで電気泳動する

• 泳動バッファーは使い回しではなく新しいものを使用
• サンプルをウェルに

(2) 3'末端のdA付加反応

1. 精製したいDNA（PCR産物など）をアガロースゲルで電気泳動する

• 泳動バッファーは使い回しではなく新しいものを使用
• サンプルをウェルに