MultiNAを使った電気泳動

MultiNAを使った電気泳動

試薬

MultiNA用試薬	ラダー
DNA-500	25bp DNA ラダー
DNA-500	25bp DNA ラダー
DNA-12000	2-Log DNA Ladder (0.1-10.0 kbp)

• 希釈色素液 SYBR Gold
• DNA マーカー溶液
• DNA 分離バッファ

ストック溶液の作成

• 希釈色素液

1. SYBR Gold 1µlとTE 99µlを混ぜ合わせる。
2. 0.2μlチューブに10μl ずつ分注する。
3. -20℃で保存する。

• ラダーを希釈する (希釈したラダーは-20℃で保存する)

1. 25bp DNA ラダーはTEで50倍に希釈する。
2. 2-Log DNA LadderはTEで100倍に希釈する。
3. pGEM DNA MarkersはTEで100倍に希釈する。

使用時に調整するもの

• 希釈色素液を分離バッファーで100倍に希釈する。必要量はサンプルを設定した後計算されるが、以下を参考に調整してもよい。

合計分析数	8分析以下	9-29分析	30-79分析	80-120分析
分離バッファーの量 (µl)	495	990	1980	2970
希釈色素液の量 (µl)	5	10	20	30

• 洗浄水の量を確認する。足りないときはミリQ水を補充する。

使用方法

1. 本体の電源を入れる。
2. 制御用コンピュータを起動する。MultiNAユーザーでログインして、MultiNA装置制御を起動する。
3. 制御ソフトの左上のMultiNAの文字がオレンジのときは本体と通信できていないのでメニューの「装置」-「接続」を実行する。

クリーニング

1. 前日使用していないときは全チップクリーニングをする。そうでないときはチップ洗浄を行う(2回)。

• 洗浄水の量を確認する。足りないときはミリQ水を補充する。
• 廃液が一杯になっていないか確認する。廃液はシンクに流す。

測定

1. 制御ソフトでサンプルの登録を行う。

MultiNA画面の新規登録をクリック

使用するプロジェクトを選択しOKをクリック

ウェルをクリック（緑色に変わる）

▶▶をクリック

サンプル名を入力

登録をクリック

1. 必要な分離バッファーとマーカーの量が表示されるので、分離バッファーは専用のチューブに、マーカーは0.5mlチューブに分注して、それぞれの蓋を開けて所定の位置に設置する。分離バッファーとマーカーのラベルの色と装置内の置き場所の色が同じ。
2. 自分のサンプルをセットする。サンプルは5µl以上必要で、そのうち1µlが使用される。
3. ラダーもセットする。ラダーは12µl程度セットする。
4. サンプルを固定するための金属の網をかぶせる。
5. 蓋をする。
6. 制御用ソフトでランを開始する。泳動終了後に自動で洗浄を2回行うようにしておく。

後片付け

1. 一日の最後に全チップクリーニングを行う。チップクリーニングを行ったまま帰宅してよい。