DNAの電気泳動
提供: 鈴木研Wiki
2017年11月24日 (金) 16:26時点における157.110.120.128 (トーク)による版
アガロースを使った電気泳動
試薬
- 1×TAE(50×TAEを50倍希釈)
- TAKARA Agarose
- 2×MightAmp Buffer 10µℓ
- GR RED Loading buffer 6×
- DNAマーカー
アガロースゲルの作製と電気泳動
アガロースの濃度 | DNAのサイズ |
0.6% | 1,000~20,000 |
0.7% | 800~10,000 |
1.0% | 500~7,000 |
1.2% | 400~6,000 |
1.5% | 200~3,000 |
2.0% | 100~2,000 |
- ゲルトレーを準備する。
- トレーのサイズに応じたTAEを三角フラスコに分注する。
- アガロースを量って入れる。
- 電子レンジでアガロースを完全に溶かす。
- 水道水でアガロース溶液を素手で持てるぐらいまで冷やす。
- トレーにアガロースを流し込む。コームをさす。
- 固まるのを待つ。
- サンプル(20μl)にGR RED Loading bufferを4μl加えて遠心する。
- 泳動層にトレーを入れ、TAEを満たす。
- サンプル10μlと左端にマーカーをアプライし、100Vで泳動する。
- 泳動が終了したら、ゲルをUV透過ゲルトレイに乗せ、トランスイルミネーターでDNAを可視化する。写真を撮る。
- SDカードから撮影したデータを保存する。