DNAの電気泳動

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アガロースを使った電気泳動

試薬

  • 1×TAE(50×TAEを50倍希釈)
  • TAKARA Agarose 
  • 2×MightAmp Buffer  10µℓ 
  • GR RED Loading buffer 6×
  • DNAマーカー

アガロースゲルの作製と電気泳動

アガロースの濃度 DNAのサイズ
0.6% 1,000~20,000
0.7% 800~10,000
1.0% 500~7,000
1.2% 400~6,000
1.5% 200~3,000
2.0% 100~2,000
  1. ゲルトレーを準備する。
  2. トレーのサイズに応じたTAEを三角フラスコに分注する。
  3. アガロースを量って入れる。
  4. 電子レンジでアガロースを完全に溶かす。
  5. 水道水でアガロース溶液を素手で持てるぐらいまで冷やす。
  6. トレーにアガロースを流し込む。コームをさす。
  7. 固まるのを待つ。
  8. サンプル(20μl)にGR RED Loading bufferを4μl加えて遠心する。
  9. 泳動層にトレーを入れ、TAEを満たす。
  10. サンプル10μlと左端にマーカーをアプライし、100Vで泳動する。
  11. 泳動が終了したら、ゲルをUV透過ゲルトレイに乗せ、トランスイルミネーターでDNAを可視化する。写真を撮る。
  12. SDカードから撮影したデータを保存する。
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