NucleoSpin Plasmid Quick Pureを使ったプラスミド抽出

試薬

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• NucleoSpin Plasmid QuickPure

A1(初めに使用する前に、RNase A (凍結乾燥品）のチューブに１ mlのBuffer A1を加えて完全に溶解し、溶解した溶液全量をBuffer A1のボトルに移す)

A2

A3

AQ(初めに使用する前に、Wash Buffer AQ（concentrate）に、4倍量のエタノール（96～100%）を添加する）

AE

• 大腸菌の培養液

実験方法

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1. 培養液の集菌

培養液をマイクロチューブにデカンテーションで移す。

11,000gで、30秒遠心する。

上清をアスピレーターで除く。

2. 菌の溶解

11,000×g で、30秒遠心する。

ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。

3. NT3 700μlをカラムに添加する。

11,000×g で、30秒遠心する。

ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。

• このステップを2回行う。

4. カラムを11,000×gで、1分遠心しメンブレンを乾燥させる。

5. カラムをマイクロチューブにセットする。

NE15〜30μlを加え、室温で1分インキュベートする。

(PCR産物50μl･･･30μl , PCR産物20μl･･･20μl)

11,000×gで、1分遠心する。