提供: 鈴木研Wiki
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MultiNAを使った電気泳動
試薬
MultiNA用試薬 |
ラダー
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DNA-500 |
25bp DNA ラダー
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DNA-2500 |
pGEM DNA Markers
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DNA-12000 |
2-Log DNA Ladder (0.1-10.0 kbp)
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- 希釈色素液 SYBR Gold
- DNA マーカー溶液
- DNA 分離バッファ (4℃)
ストック溶液の作成
- SYBR Gold 1µlとTE 99µlを混ぜ合わせる。
- 0.2μlチューブに10μl ずつ分注する。
- -20℃で保存する。
- ラダーを希釈する (希釈したラダーは-20℃で保存する)
- 25bp DNA ラダーはTEで50倍に希釈する。
- 2-Log DNA LadderはTEで100倍に希釈する。
- pGEM DNA MarkersはTEで100倍に希釈する。
使用時に調整するもの
- 希釈色素液を分離バッファーで100倍に希釈する。必要量はサンプルを設定した後計算されるが、以下を参考に調整してもよい。
合計分析数 |
8分析以下 |
9-29分析 |
30-79分析 |
80-120分析
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分離バッファーの量 (µl) |
495 |
990 |
1980 |
2970
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希釈色素液の量 (µl) |
5 |
10 |
20 |
30
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使用方法
- 本体の電源を入れる。
- 制御用コンピュータを起動する。MultiNAユーザーでログインして、MultiNA装置制御を起動する。
- 制御ソフトの左上のMultiNAの文字がオレンジのときは本体と通信できていないのでメニューの「装置」-「接続」を実行する。
クリーニング
- 前日使用していないときは全チップクリーニングをする。そうでないときはチップ洗浄を行う(2回)。
- 洗浄水の量を確認する。足りないときはミリQ水を補充する。
- 廃液が一杯になっていないか確認する。廃液はシンクに流す。
測定
- 1. 制御ソフトでサンプルの登録を行う。
- MultiNA画面の新規登録をクリック
- 使用するプロジェクトを選択しOKをクリック
- ウェルをクリック(緑色に変わる)
- ▶▶をクリック
- サンプル名を入力
- 登録をクリック
- 2. 必要な分離バッファーとマーカーの量が表示されるので、分離バッファーは専用のチューブに、マーカーは0.5mlチューブに分注して、
- それぞれの蓋を開けて所定の位置に設置する。分離バッファーとマーカーのラベルの色と装置内の置き場所の色が同じ。
- 3. 自分のサンプルをセットする。サンプルは5µl以上必要で、そのうち1µlが使用される。
- 4. ラダーもセットする。ラダーは12µl程度必要。
- 5. サンプルを固定するための金属の網をかぶせる。
- 6. 蓋をする。
- 7. 制御用ソフトでランを開始する。泳動終了後に自動で洗浄を2回行うようにしておく。
後片付け
- 一日の最後に全チップクリーニングを行う。チップクリーニングを行ったまま帰宅してよい。