大腸菌DH5aの形質転換

大腸菌DH5αの形質転換

1. DH5aのコンピテントセルを氷上で溶かす。

• チューブ1本につき100µl。1本使い切らない場合は、使う分だけ新しいチューブにとる。残ったチューブには蓋に残量を記入して-80℃に戻す

1. 導入するDNA（プラスミド）を加えて、チップの先で混ぜる。

• 入れるDNAの量は、コンピテントセルの容量の1/10以下にする

1. 30分間氷上で保温する。
2. 42℃で30秒ヒートショックを与える。
3. すぐに氷上に戻し、2分置く。その後、コンピテントセルの10倍量のSOC培地を加える。
4. 37℃で1時間振とう培養する。
5. 適当な抗生物質の入ったLBプレートに撒く。一晩37℃で培養する。