NucleoSpin Plasmid EasyPureを使ったプラスミド抽出

A1(初めに使用する前に、添付の RNase A 溶液を加える)

A2

A3

AQ(初めに使用する前に、Wash Buffer AQ（concentrate）に、4倍量のエタノール（96～100%）を添加する）

AE

1. 培養液の集菌

培養液をマイクロチューブにデカンテーションで移す。

12,000g以上で室温、30秒遠心する。

上清をアスピレーターで除く。

2. 菌の溶解

ペレットにA1 150μlを加えボルテックスで完全に溶解する。

A2 250μlを加え、チューブを5回上下反転（ボルテックスはしない）。

室温で2分静置する（この段階で溶菌して、液体の透明度が上がる）。

A3 350μlを加え、チューブを上下反転（A2の青色が消えるまで。ボルテックスはしない）

3.ライセートの清澄化

12,000×g以上（遠心機の最高速度：15,000rpm）で室温、3分間遠心する。

4.カラムへの吸着

Collection Tubeにカラムをセットする。

上清をカラムに加える。

1,000～2,000×g（およそ4,000rpm）で室温、30秒間遠心する。

ろ液を捨て、カラムを同じCollection Tubeにセットする。

5. メンブレンの洗浄

AQ 450μlを加える。

12,000×g以上（遠心機の最高速度：15,000rpm）で室温、1分間遠心する。

6.DNAの溶出

カラムをマイクロチューブにセットする。

AE 50μlを加え、室温で1分間インキュベートする。

12,000×g以上（遠心機の最高速度：15,000rpm）で、1分間遠心する。