MultiNAを使った電気泳動

MultiNAを使った電気泳動

試薬

MultiNA用試薬	ラダー
DNA-500	25bp DNA ラダー
DNA-12000	2-Log DNA Ladder (0.1-10.0 kbp)

• SYBR Gold

ストック溶液の作成

• 希釈色素液

1. SYBR Gold 1µlとTE 99µlを混ぜ合わせる
2. -20℃で保存する。

• ラダーを希釈する (希釈したラダーは-20℃で保存する)

1. 25bp DNA ラダーはTEで50倍に希釈する。
2. 2-Log DNA LadderはTEで100倍に希釈する。

使用時に調整するもの

• 希釈色素液を分離バッファーで100倍に希釈する。必要量はサンプルを設定した後計算されるが、以下を参考に調整してもよい。

合計分析数	8分析以下	9-29分析	30-79分析	80-120分析
分離バッファーの量 (µl)	495	990	1980	2970
希釈色素液の量 (µl)	5	10	20	30

• 洗浄水の量を確認する。足りないときはミリQ水を補充する。

使用方法

前日使用していないときは全チップクリーニングをする。 一日の最初にチップ洗浄を行う(2回)。

MultiNA装置制御を起動する。 サンプルの登録を行う。 必要な分離バッファーとマーカーの量が表示されるので、分離バッファーは専用のチューブに、マーカーは0.5mlチューブに分注して、所定の位置に設置する。分離バッファーとマーカーのラベルの色と装置内の置き場所の色が同じ。 自分のサンプルをセットする。サンプルは5µl以上必要で、そのうち1µlが使用される。 ラダーもセットする。ラダーは10µl程度セットする。 サンプルを固定するための金属の網をかぶせる。 蓋をする。 制御用ソフトでランを開始する。泳動終了後に自動で洗浄を2回行うようにしておく。

一日の最後に全チップクリーニングを行う。チップクリーニングを行ったまま帰宅してよい。