トマト葉からのDNA抽出方法

器具、試薬

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• トマトの葉
• 液体窒素
• Plant DNA Isolation Reagent

Extraction Solution 1

Extraction Solution 2

Extraction Solution 3

• イソプロパノール
• 70%エタノール
• TE溶液
• ヒートブロック
• 遠心機

実験方法

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手袋を着用して、実験を行う。

1. トマトの葉100mg程を量り、乳鉢に入れる。
   液体窒素を入れて、乳棒ですりつぶす。
2. Extraction Solution 1　400μlを加えて乳鉢の中でよく混ぜる。
3. Extraction Solution 2　80μlを加えて乳鉢の中でよく混ぜる。
4. マイクロチューブ(1.5ml)に移す。
5. Extraction Solution 3　150μlを加えてよく混ぜる(ボルテックスなど)。
6. ヒートブロック(50℃)に15分間置く。
7. 15000rpmで15min遠心し、上澄みを別のマイクロチューブにとる。
8. 上澄みに同量のイソプロパノールを加え、混合してDNAを沈殿させる。
9. 別のマイクロチューブに70%エタノールを1mlとり、DNAを入れる。
10. 15000rpmで5min遠心して、エタノールを除き、乾燥させる。
11. TE溶液100μlを加えて、4℃で保存する。