C培地の作成 (クンショウモの育成)

組成

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[[[1]] ＋　品川さんノート（中部大No.2・28頁）を参照

	ストック (100ml)		終濃度 (100ml)	100mlに対し入れる量
Ca(NO3)2	1.5g	100×	15mg
KNO3	1g	100×	10mg
Na2glycerophosphate	0.5g	100×	5mg
MgSO4	0.8g	200×	4mg
Tris-Hcl(pH7.5) (*3)	5g	100×	50mg
PIV metals (*1)			300μl
Vitamin Mix 1000×/ml (*2)
*Vitamin B12	0.1μg/ml	1000×	0.01μg
*Biotin	0.1μg/ml	1000×	0.01μg
*Thiamine Hcl	10μg/ml	1000×	1μg

• 0.3% Gellan Gum

（ストック溶液）

• PIV metals (*1)：100ml作る場合

試薬	ストック液	添加量 (100ml)	備考
MnCl2	1000x	0.1 ml	-20℃：下扉左上1段目
ZnCl2	1000x	0.1 ml	-20℃：下扉左上1段目
CoCl2	1000x	0.1 ml	-20℃：下扉左上1段目
Na2MoO4	1000x	0.1 ml	-20℃：下扉左上1段目
FeCl3	50x	2 ml	4℃
Na2EDTA・2H2O	1000x	100 mg	試薬棚(N)、2NA(EDTA・2H2O)

• C培地 1000xビタミン (*2)：5ml作る場合

試薬	ストック液		添加量(5ml)	備考
Vitamin B12	1mg/100ml	100x	50 µl	-20℃：下扉左上1段目
Biotin	1mg/100ml	100x	50 µl	-20℃：下扉左上1段目
Thiamine HCl	5mg/5ml	100x	50 µl	-20℃：下扉左上1段目

• Tris-HCl (pH7.5) (*3)：(100x) 5g/100ml

実験方法

1.　メスシリンダーに

• Elix 水

• Ca(NO3)2

• KNO3

• Na2glycerophosphate

• MgS04

• Tris-Hcl (pH7.5)

• PIV metals

• Vitamin Mix 1000×

以上の8つを入れて、メスアップする

2. メデュウムビンに

• 0.3％ Gellan Gum

を入れ、アルミホイルで蓋を覆い、培地の種類、作製日、作成者を書く

メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)