ストレプトアビジンビーズを使った精製

試薬

Binding Buffer (2x)

20mM Tris-HCl (pH 7.4)、1mM EDTA、2M NaCl、0.1% Tween20

操作

1. Magnosphere MS300/Streptavidin をよく混ぜ、100µlをとる。
2. 磁石スタンドに立てて、ビーズを集める(1分)。上清を捨てる。
3. 200µl 1x Binding Bufferを加えて混ぜる。ビーズを集めて上清を捨てる。
4. ビオチン化したDNAを等量の2x Binding Bufferと混ぜて、ビーズに加える。
5. ローテーターで混ぜながら、10分間室温に置く。
6. ビーズを回収する。200µl 1x Binding Bufferで洗う(3回)。
7. ビーズを回収して、適当な液に懸濁する。

備考

• ビーズ濃度は10 mg/ml。ビオチンの結合量は400-600 pmol/mg (4-6 nmol/ml)。