ムラシゲ・スクーグ培地の作製

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::* 2×MS塩
 
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::* 5% MES-KOH (pH5.7)
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::* 2% Sucrose
 
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::* 1000×B5-Vitamin(-20℃)
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:: 以上の5つを入れて、スターラーにかける
 
:: 以上の5つを入れて、スターラーにかける
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::* 2 のMS塩
 
::* 2 のMS塩
  
:: を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ(121℃、15min)
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:: を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)
  
  
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: 4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、
 
: 4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、
  
::* 0.1 μM ルシフェリン(-20℃)
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::* 0.1 μM ルシフェリン (-20℃)
  
 
:: を加える。
 
:: を加える。

2017年9月26日 (火) 14:49時点における版

シロイヌナズナの育成のための培地作り

組成



ストック濃度 終濃度
MS塩
MES-KOH (pH 5.7) 5 % 0.05 %
B5-Vitamin 1000×
Sucrose 1 %
Gellan Gum 0.3 %
ルシフェリン 0.1 μM 5 mM
MS塩:ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類
1000×:1000×B5-Vitamin/100ml

実験方法


1. メスシリンダーに
  • 2×MS塩
  • 5% MES-KOH (pH 5.7)
  • Elix 水
  • 2% Sucrose
  • 1000×B5-Vitamin (-20℃)
以上の5つを入れて、スターラーにかける


2. Sucroceが溶けたら1Lにメスアップする


3. メデュウムビンに
  • 0.3% Gellan Gum
  • 2 のMS塩
を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)


ここからはクリーンベンチ内で操作すること


4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、
  • 0.1 μM ルシフェリン (-20℃)
を加える。


5. 滅菌2号角シャーレに分注し、固まるまで放置。
固まったらビニール袋に入れ、培地の種類、作製日、作製者を書く
ルシフェリン入りの培地はアルミホイルに包み、クリーンベンチから取り出して保管。
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