各種試薬の作製方法（覚え書き）

2023年11月13日 (月) 11:25時点における版

SOC培地 もどき　（LB培地+20mMグルコース）

大腸菌等の形質転換時に使うSOC培地は、以下のもので代用

1. 液体LB培地を作製　（LB broth：2g/100ml　＠200mlビーカー）→　オートクレーブ
2. (クリーンベンチにて)　2M グルコース溶液（オートクレーブ済み） を1ml（1/100量）添加　※終濃度:20mM
3. 1.5mlチューブに1mlずつ分注　（100本できる）

• 分注には、分注器＋コンビチップを使うと便利
• 1.5mlチューブ100本＝大コーヒー瓶1本分　→　ユニパックG-4・1袋に回収

種子滅菌液

（5%ブリーチ液）: 次亜塩素酸ナトリウム 5ml、10% Triton 200μl / 100ml

MES-KOH (5%, pH5.7)

MES 10g / 200ml で作製

1. MES 10gを量り取って、適量の水（150ml程度）で溶解
2. MESが溶解したら、1M KOHでpH5.7に合わせる
3. 200mlまでメスアップし、この段階で再びpHを調節する

• pH調整で添加する1M KOHは13～16ml程度と量が多いので、最初の溶解時には、この分を考慮する
• メスアップするとpHが変動するため、最終容量でのpH調整が必須。（この時は最初よりpHが変動しやすいので注意）

50 x TAE

※現在は、50xTAEを購入しているので、この方法では作製していないが、記録として記載

以上のものを混ぜて、1Lにメスアップする。