ムラシゲ・スクーグ培地の作製
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| − | * | + | * 0.05％ MES-KOH pH5.7 5% Mes-KOH pH5.7 |
| − | *[[1000×B5-Vitamin]] | + | * 1×B5-Vitamin [[1000×B5-Vitamin/100ml]] |
| − | * | + | * 1% Sucrose(スクロース) |
| − | * | + | * 0.3% Gellan Gum |
| − | * | + | * 10μM ルシフェリン |
| − | * | + | * 2ml (-20℃) |
| − | * 滅菌2号角シャーレ 15枚 | + | * 滅菌2号角シャーレ 15枚 1ml (-20℃) |
=== 実験方法 === | === 実験方法 === | ||
2017年9月22日 (金) 17:15時点における版
シロイヌナズナの育成のための培地作り
組成
- 1×MS塩 ストック 2×MS塩
- (ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類)
- 0.05％ MES-KOH pH5.7 5% Mes-KOH pH5.7
- 1×B5-Vitamin 1000×B5-Vitamin/100ml
- 1% Sucrose(スクロース)
- 0.3% Gellan Gum
- 10μM ルシフェリン
- 2ml (-20℃)
- 滅菌2号角シャーレ 15枚 1ml (-20℃)
実験方法
- 1. 1Lポリビーカーに
- 脱イオン水 約800ml
- MS Plant Salt Mixture(ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類) 4.6g(1袋)
- Sucrose(スクロース) 10g
- 1000×B5-Vitamin 1ml(-20℃)
- 0.5M MES-KOH 5ml(4℃)
- 以上の5つを入れて、スターラーにかける。
- 2. スターラーにかけながらpHメーターを使い、
- 1M KOH を少しずつ加えて、pHを5.7に合わせる。
- 3. 1Lにメスアップし、
- Gellan Gum 3g
- を加え、アルミホイルでポリビーカーの蓋をしてオートクレーブ(121℃、15min)
ここからはクリーンベンチ内で操作すること
- 4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、
- ルシフェリン 2ml(-20℃)
- を加える。
- 5. 滅菌2号角シャーレ15枚に分注し、固まるまで放置。
- 固まったらアルミホイルで包み、作製日、作製者を書き込んで
- クリーンベンチから取り出して保管。
