ムラシゲ・スクーグ培地の作製
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− | : 1. | + | : 1. メスシリンダーに |
− | ::* | + | ::* 2×MS塩 |
− | ::* | + | ::* 5% MES-KOH (pH5.7) |
− | ::* | + | ::* Elix水 |
− | ::* | + | ::* 2% Sucrose |
− | ::* | + | ::* 1000×B5-Vitamin(-20℃) |
− | :: | + | :: 以上の5つを入れて、スターラーにかける |
− | : 2. | + | : 2. Sucroceが溶けたら1Lにメスアップする |
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+ | : 3. メデュウムビンに | ||
− | : | + | ::* 0.3% Gellan Gum |
− | ::* | + | ::* 2 のMS塩 |
− | :: | + | :: を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ(121℃、15min) |
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: 4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、 | : 4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、 | ||
− | ::* ルシフェリン | + | ::* 0.1 μM ルシフェリン(-20℃) |
:: を加える。 | :: を加える。 | ||
− | : 5. | + | : 5. 滅菌2号角シャーレに分注し、固まるまで放置。 |
− | :: | + | :: 固まったらビニール袋に入れ、培地の種類、作製日、作製者を書く |
− | :: | + | :: ルシフェリン入りの培地はアルミホイルに包み、クリーンベンチから取り出して保管。 |
2017年9月26日 (火) 14:43時点における版
シロイヌナズナの育成のための培地作り
組成
ストック濃度 | 終濃度 | |
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MS塩 | 2× | 1× |
MES-KOH | 5 % | 0.05 % |
B5-Vitamin | 1000× | 1× |
Sucrose | 1 % | |
Gellan Gum | 0.3 % | |
ルシフェリン | 0.1 μM | 5 mM |
- MS塩:ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類
- 1000×:1000×B5-Vitamin/100ml
実験方法
- 1. メスシリンダーに
- 2×MS塩
- 5% MES-KOH (pH5.7)
- Elix水
- 2% Sucrose
- 1000×B5-Vitamin(-20℃)
- 以上の5つを入れて、スターラーにかける
- 2. Sucroceが溶けたら1Lにメスアップする
- 3. メデュウムビンに
- 0.3% Gellan Gum
- 2 のMS塩
- を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ(121℃、15min)
ここからはクリーンベンチ内で操作すること
- 4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、
- 0.1 μM ルシフェリン(-20℃)
- を加える。
- 5. 滅菌2号角シャーレに分注し、固まるまで放置。
- 固まったらビニール袋に入れ、培地の種類、作製日、作製者を書く
- ルシフェリン入りの培地はアルミホイルに包み、クリーンベンチから取り出して保管。