ムラシゲ・スクーグ培地の作製
提供: 鈴木研Wiki
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:MS塩：ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類 | :MS塩：ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類 | ||
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| + | そのほか必要に応じていれるもの | ||
| + | カナマイシン ストック 50 mg/ml 終濃度 50 mg/l | ||
| + | ハイグロマイシン ストック 20 mg/ml 終濃度 10 mg/l | ||
| + | ルシフェリン ストック 5 mM 終濃度 10 μM | ||
=== 実験方法 === | === 実験方法 === | ||
2019年6月7日 (金) 10:38時点における版
シロイヌナズナの育成のための培地作り
組成
| ストック濃度 | 終濃度 | |
|---|---|---|
| MS塩 | 2× | 1/2× |
| MES-KOH (pH 5.7) | 5 ％ | 0.05 ％ |
| B5-Vitamin | 1000× | 1× |
| Sucrose | 2 % | |
| Gellan Gum | 0.3 % |
- MS塩：ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類
- 1000×：1000×B5-Vitamin/100ml
そのほか必要に応じていれるもの カナマイシン ストック 50 mg/ml 終濃度 50 mg/l ハイグロマイシン ストック 20 mg/ml 終濃度 10 mg/l ルシフェリン ストック 5 mM 終濃度 10 μM
実験方法
- 1. メスシリンダーに
- ２×MS塩
- ５％ MES-KOH (pH 5.7)
- Elix 水
- ２％ Sucrose
- 1000×B5-Vitamin (-20℃)
- 以上の5つを入れて、スターラーにかける
- 2. Sucroceが溶けたら1Lにメスアップする
- 3. メデュウムビンに
- 0.3％ Gellan Gum
- 2 のMS塩
- を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)
ここからはクリーンベンチ内で操作すること
- 4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、
- 10 μM ルシフェリン (-20℃)
- を加える。
- 5. 滅菌2号角シャーレに分注し、固まるまで放置。
- 固まったらビニール袋に入れ、培地の種類、作製日、作製者を書く
- ルシフェリン入りの培地はアルミホイルに包む
- 4℃で保管 (プレートは逆さにする）
