ムラシゲ・スクーグ培地の作製

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シロイヌナズナの育成のための培地作り

組成



ストック濃度 終濃度
MS塩
MES-KOH 5 % 0.05 %
B5-Vitamin 1000×
Sucrose 1 %
Gellan Gum 0.3 %
ルシフェリン 0.1 μM 5 mM
MS塩:ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類
1000×:1000×B5-Vitamin/100ml

実験方法


1. メスシリンダーに
  • 2×MS塩
  • 5% MES-KOH (pH5.7)
  • Elix水
  • 2% Sucrose
  • 1000×B5-Vitamin(-20℃)
以上の5つを入れて、スターラーにかける


2. Sucroceが溶けたら1Lにメスアップする


3. メデュウムビンに
  • 0.3% Gellan Gum
  • 2 のMS塩
を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ(121℃、15min)


ここからはクリーンベンチ内で操作すること


4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、
  • 0.1 μM ルシフェリン(-20℃)
を加える。


5. 滅菌2号角シャーレに分注し、固まるまで放置。
固まったらビニール袋に入れ、培地の種類、作製日、作製者を書く
ルシフェリン入りの培地はアルミホイルに包み、クリーンベンチから取り出して保管。
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