ムラシゲ・スクーグ培地の作製

シロイヌナズナの育成のための培地作り

組成

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	ストック濃度	終濃度
MS塩	2×	1/2×
MES-KOH (pH 5.7)	5 ％	0.05 ％
B5-Vitamin	1000×	1×
Sucrose		2 %
Gellan Gum		0.3 %

MS塩：ムラシゲ・スクーグ培地用混合塩類

1000×：1000×B5-Vitamin/100ml

そのほか必要に応じていれるもの カナマイシン ストック 50 mg/ml 終濃度 50 mg/l ハイグロマイシン ストック 20 mg/ml 終濃度 10 mg/l ルシフェリン ストック 5 mM 終濃度 10 μM

実験方法

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1.　メスシリンダーに

• ２×MS塩

• ５％ MES-KOH (pH 5.7)

• Elix 水

• ２％ Sucrose

• 1000×B5-Vitamin (-20℃)

以上の5つを入れて、スターラーにかける

2. Sucroceが溶けたら1Lにメスアップする

3. メデュウムビンに

• 0.3％ Gellan Gum

• 2 のMS塩

を入れ、メデュウムビンの蓋を少し緩め、オートクレーブ (121℃、15min)

ここからはクリーンベンチ内で操作すること

4. オートクレーブ後、スターラーで撹拌しながら冷まし、

• 10 μM ルシフェリン (-20℃)

を加える。

5. 滅菌2号角シャーレに分注し、固まるまで放置。

固まったらビニール袋に入れ、培地の種類、作製日、作製者を書く

ルシフェリン入りの培地はアルミホイルに包む

4℃で保管 (プレートは逆さにする）