シロイヌナズナの遺伝子型の判定

試薬

• 0.4M NaOH
• 0.1M Tris-HCl pH 6.8

DNA抽出 　マルチビーズショッカー

1. 葉を一枚切り取り、サンプル破砕用チューブに入れる
2. ビーズを一粒入れる
3. 40 µlの0.4M NaOHを入れる
4. 2000rpmで5秒オン、2秒オフのサイクルを2回行う
5. 遠心(フラッシュ)
6. 200 µlの0.1M Tris-HClを加える
7. よく混合し、遠心(フラッシュ)
8. 上清を鋳型として用いる

PCR

反応液の組成

	1サンプル
ExTaq	0.1 µl
10×ExTaq Buffer	2 µl
2.5mM dNTP	1.6 µl
プライマー	終濃度0.2 µM
プライマー	終濃度0.2 µM
DNA	1 µl
滅菌水	up to 20 µl
合計	20 µl

反応

1. 95℃ 3分
2. [95℃ 45秒、(アニーリング)55℃ 45秒、(伸長反応)72℃ 2分] のサイクルを35回
3. 72℃ 5分 (→ 4℃ ∞)