シロイヌナズナの遺伝子型の判定
提供: 鈴木研Wiki
2016年11月29日 (火) 13:10時点における157.110.120.101 (トーク)による版
試薬
- 0.4M NaOH - 0.1M Tris-HCl pH 6.8
- DNA抽出 [#j64f9f7e]
+ サンプル破砕用チューブに40μlの0.4M NaOHを入れる + 葉を一枚切り取り、チューブに入れる + ビーズを一粒入れる + 20Hzで1分間破砕、を2回行う + 遠心(フラッシュ) + 200μlの0.1M Tris-HClを加える + よく混合し、遠心(フラッシュ) + 上清を鋳型として用いる
- PCR [#uf41d964]
- 反応液の組成 [#jccdf9dc]
|ExTaq|0.1μl| |Buffer|2μl| |2.5mM dNTP|1.6μl| |プライマー|終濃度0.2μM| |DNA|1μl| ||20μl|
- 反応 [#o885ee03]
95℃ 3分 95℃ 45秒、55℃ 45秒、72℃ 2分、のサイクルを35回 72℃ 5分