各種試薬の作製方法(覚え書き)

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目次


SOC培地 もどき (LB培地+20mMグルコース)

大腸菌等の形質転換時に使うSOC培地は、以下のもので代用

  1. 液体LB培地を作製 (LB broth:2g/100ml @200mlビーカー)→ オートクレーブ
  2. (クリーンベンチにて) 2M グルコース溶液(オートクレーブ済み) を1ml(1/100量)添加 ※終濃度:20mM
  3. 1.5mlチューブに1mlずつ分注 (100本できる)
  • 分注には、分注器+コンビチップを使うと便利
  • 1.5mlチューブ100本≒大コーヒー瓶1本分 → ユニパックG-4・1袋に回収


種子滅菌液

(5%ブリーチ液): 次亜塩素酸ナトリウム 5ml、10% Triton 200μl / 100ml


MES-KOH (5%, pH5.7)

MES 10g / 200ml で作製

  1. MES 10gを量り取って、適量の水(150ml程度)で溶解
  2. MESが溶解したら、1M KOHでpH5.7に合わせる
  3. 200mlまでメスアップし、この段階で再びpHを調節する
  • pH調整で添加する1M KOHは13~16ml程度と量が多いので、最初の溶解時には、この分を考慮する
  • メスアップするとpHが変動する(下がる)ため、最終容量でのpH調整が必須。(この時は最初よりpHが変動しやすいので注意)

50 x TAE

※現在は、50xTAEを購入しているのでこの方法では作製していないが、記録として記載

試薬 分量
Tris 242 g
酢酸 57.1 ml
EDTA・2Na 18.6 g

以上のものを混ぜて、1Lにメスアップする。

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